Щам Acinetobacter junii 5 микроорганизми, имащи способността да се използват въглеводороди

Употреба: Microbiology, особено за петролев биоразграждане смеси. ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО изолира нов щам от Acinetobacter junii 5 микроорганизми от почвени проби. Таблица 1.

Изобретението се отнася до областта на Applied Microbiology, а именно, щамове от микроорганизми, способни да използват въглеводороди.

Известен възможност на редица микроорганизми разположен въглеводороди. По-специално, за тези цели Aspergillus Нигер Aspergillus SP. Candida тропически, Pseudomonas putida [1 март] Най-известният за тази цел дадоха щамове Пс. putida, формулировка "Putidoyl" се получава въз основа на която [4] Въпреки това, споменатият препарат не работят ефективно за всички въглеводороди или смеси от тях, което причинява търсенето на по-активни в това отношение микроорганизми.

Задачата решен в настоящото изобретение е да се получи щам от Acinetobacter бактерии, способни да използват въглеводороди.

Този проблем е решен от щам Acinetobacter junii получава 5.

Щамът се изолира от почвени проби Katanga Област на региона Иркутск в средата, съдържаща въглеводороди, и бяха избрани за способността да използват максимално пентадекан.

Щамът се култивира при 28 ° С в продължение на 48 часа в течна хранителна среда, съдържаща хидролизат цаца 10,05 грама; 4.95 грама натриев хлорид; дестилирана вода до 1 литър; рН (преди автоклавиране) 7.1.

Бульон хомогенна мътността и слаб фина утайка. Последователност вискозно бульон. Когато посяване в полутвърда среда (0.6% агар) и дебелината на гъста хранителна среда (агар 1,5%) увеличаване на дебелината на агар офлайн. Растежът на колонии се наблюдава само на повърхността на средата.

На повърхността на твърда хранителна среда колониите имат редовен кръгла форма. Диаметър на колоната 2 до 3 мм. Колониите гладки, изпъкнали, белезникави, заобиколени от прозрачен хало с неправилна форма. Краят на колониите е гладка, застаряващите колониите (след 6 дни), тя се превръща вълнообразни.

Пигментът разпространява в средата, не.

Клетъчната морфология Грам клетки са с кръгла форма. диаметър Cell от 1.2 микрона. Камшичета и пили не са. Единични клетки и diplococci, неподвижни.

Физиологични характеристики на щама: аеробни, неподвижен, katalozo-позитивни, оксидаза-отрицателни, не втечнява желатин. Не расте на глюкоза, захароза, лактоза, малтоза, L-арабиноза, манитол, сорбитол, глицерол, L-фенилаланин, натриев цитрат, L-хистидин, ако се използва като единствен източник на въглерод.

Когато се отглеждат върху минимална среда може да се използва като единствен източник на въглерод, метанол, етанол, Tween-80, декан, додекан, пентадекан, хексадекан, вазелин. Тя расте в среда, съдържаща ампицилин а при концентрация от 100 мкг / мл.

Анаеробно Тест Хю Leyfsona отрицателна. Той не представлява индол, сряда Klinger не отделя сероводород. Хемолиза на кръвен агар не.

Той не нитрат, arginindegidrolazy, лизин декарбоксилаза, орнитин декарбоксилаза, triptofandezaminazy.

Щамът може да расте в рН интервал от 6,5 9,5. Оптималната стойност на рН 7.2.

температурен диапазон от 20 30 ° С оптимална температура на растеж е 28 ° С

Щамът не разполага с азот за определяне свойства. Не е патогенен.

Щамът се съхранява при 4 ° С върху хранителна среда, съдържаща 0.06 0.09% общ азот 0.4, допълнен с 0.2% агар. съхранение до 1 година.

Дългосрочно съхранение (2 години или повече) се извършва под формата на лиофилизиран в запечатани ампули. Защитно среда при сушене 5,5% лактоза, 1.7% poliglyukina.

Щамът се култивира при 28 ° С върху хранителна среда за 24 часа в среда семена в продължение на 72 часа.

хранителна среда течност: Tryptic хидролизат цацата 10.05гр, натриев хлорид 4,95 грама Дестилирана вода до 1 литър рН (преди автоклавиране) 7.1.

гъста хранителна среда: хидролизира цацата 17,9 грама натриев хлорид 5,9 грама, агар 11,2 грама, дестилирана вода до 1 литър рН (преди автоклавиране) 7.2.

Засяване среда: 1,52 грама калиев нитрат, амониев дихидроген фосфат 2,95 грама двуосновен калиев фосфат 0,87 гр натриев дихидроген фосфат 1.2 гр Натриев хлорид 0,5 грам магнезиев сулфат 0,1 грама, калциев хлорид, 0.025 грама дрожден екстракт 0,1 гр, пентадекан 0.5% дестилирана вода до 1 литър рН (преди автоклавиране) 7.0.

Генетични характеристики на щама в избора на щам не е изложена на мутагенни агенти и генетични инженерни техники.

активността на щама се определя индиректно с появата на помътняване ин витро когато се отглежда в хранителна среда семена след 72 часа инкубация.

Понастоящем щам се използва за получаване на препарат от компоненти, имащи биовъстановителни свойства по отношение на замърсяване на околната среда петролни продукти.

Практическа приложимост щам илюстрира със следните примери.

При използване на лекарството "Putidoyl" в доза от 10 5 клетки / мл при 18 ° С степента на разграждане е 10 дни 53% след 20 дни - 83% 30 дни 94,2% Пример 2.

Към колба, съдържаща 0.1% амониев фосфат, 0,02% KCI, прибавя суспензия от бактерии основава на крайна концентрация от 10 3 клетки / мл и 1% масло Novolabitovskogo областта. Сместа се държи в продължение на 30 дни при 20 ° С степента на разграждане масло след 10 дни е 89% след 20 дни - 96,9% след 30 дни 99.91% Както може да се види от горните експерименти, претендирания щам е в състояние ефективно да се използват като отделни въглеводороди и смеси от тях в широк температурен диапазон.

литература
1. Ю.Н. Karasevich. Бази избор на микроорганизми, като се използват синтетични органични съединения. Наука, Москва, 1982 година.

2. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1977, кн. 78, 1, стр. 401-410.

3. Агр. Biol. Chem. 1968, с. 32, 8, стр. 1033 1039.

4. J. Bacteriol. 1976 г., с. 125, 3, стр. 818.

5. Обобщение детерминанта на бактерии Bergi. Мир, 1980 г., стр. 244.

6. Steynner R. и др. Световната микроби. Том 3, Мир, 1979, стр. 142.

7. J. Gen. Microbiol. 1973, кн. 74, 1, стр. 139 148.

Щамът на микроорганизъм Acinetobacter junii N D "ARRIAM-484" (колекция на Института за земеделието микробиология), имащ способността да се използват въглеводороди.