Структурата на ДНК и РНК

1. Молекула на ДНК спирала оформен от две полинуклеотидни вериги на усукване един спрямо друг и около общата ос (фиг. 3.1).

2. първичната структура на ДНК вериги - е от порядъка на преплетена dezoksiribonukleozidmonofosfatov (dNMP) във веригата на полинуклеотид. Mononukleo-Chida общуват помежду си, 3 ', 5'-фосфодиестерни връзки-ТА. Краищата на веригите полинуклеотидни различават по структура: фосфатна група на 5 'край, разположен в края на Z'-веригата - свободната ОН-група.

3. верига полинуклеотид в ДНК молекула двойноверижна разположени антипаралелен. Отнася лен верига се държат заедно от водородни връзки между допълнителни бази азотен Е А-Т и G-C. Допълнителни бази лежат в равнина, която е по същество перпендикулярна на главната ос на спиралата.

Между основата на двойно-верижна молекула, притежаваща хидрофобни взаимодействия, които стабилизират двойната спирала.

Вериги са комплементарни, но не са идентични една на друга, нуклеотидната състава на различни схеми.

4. Всяка ДНК молекула е опакован в отделна хромозома. Хромозоми съдържат различни протеини, свързани със специфични ДНК последователности. Всички ДНК-свързващ euka Ryota протеини могат да бъдат разделени на 2 групи: хистони и не-хистонови протеини. Комплекс от протеини с ядрената ДНК на клетките се нарича хроматин.

6. протеини не-хистонови - различни видове окачване контрол-ценен протеини, които се свързват към специфични ДНК последователности и ензими, участващи в биосинтезата на матрицата.

7. първичната структура на РНК - процедура за разделяне ribonukleozidmonofosfatov (NMP) във веригата на полинуклеотид. Мононуклеотиди свързани заедно 3 ', 5'-фосфодиестерни връзки. Разграничаване тРНК, рРНК и тРНК; всички видове РНК имат една полинуклеотидна верига.

8. избрани части от РНК вериги образуват завъртане цикъл ralizovannye - "остър" - чрез водородни връзки между допълнителни азотни основи A-U и G-C.

1. За да се изолира ДНК от хомогенат на тъкан се отстранява фрагменти и мембрани на клетъчни органели чрез центрофугиране. Протеините са унищожени
протеази, извлечени от разтвора (протеиназа К най-често се използва). След това ДНК се утаява, например с етанол и след отстраняване на супернатанта
ДНК течност се разтваря в буферен разтвор.

2. ДНК молекулата съдържа среден размер 150 000 000 базови двойки и има дължина от 4 cm.
Следователно, ДНК молекулите са чувствителни към срязващи сили, които възникват в разтвор и в процеса на изолиране на ДНК от тъкани това ruetsya фрагмент. Получен ДНК молекула е много по-малко оригинален, но все още е много голям - хиляди

и дали десетките хиляди базови двойки. Тези молекули са неудобни за научни изследвания, и те трябва да бъдат допълнително £ ragmentirovat.

За раздробяване използване ограничение - ензими, изолирани от бактерии. В бактерии, тези ензими са включени в разрушаването на чужденеца за тяхната ДНК. Рестрикционни ензими "разпознават" специфична последователност от 4-6 нуклеотида (рестрикционни сайтове), които се намират в човешката ДНК. Има много различни рестрикционни ензими, всеки от които "научава" си рестрикционен сайт (фиг. 3.3).

Използване на набор от рестрикционни ензими може да намали ДНК молекула на фрагменти с желана дължина. Например, за изучаване на първичната структура на подходящи фрагменти от около 300 нуклеотидни чифта BP Следователно, цялата ДНК молекула 150000000 т.к. Трябва да се намали до 500 000 броя и всеки от фрагментите учи отделно.

Полимеразна верижна реакция (PCR). Състоящ се от конференция Дения някои изследвания изисква голям брой добре пречистен Vysokomol acous- ДНК. PCR метод дава възможност за селективно синтезира ин витро ДНК и малки порции в продължение на 3-4 часа, за да се получи множество копия на тест Milli нов фрагмент. Обектите за изолиране на ДНК могат да бъдат кръв, тъкан биопсия, слюнка, урина, околоплодна течност и т.н. Подробности за метода и прилагането му в ДНК диагностика ще бъдат обсъдени в темата 3.10.

Хибридизация. За да се изследва спецификата на видовете метод хибридизиране на нуклеинова киселина се използва. Тя се основава на способността на ДНК денатурация при нагряване (80-90 ° С) и последващо охлаждане renativatsii. Може да се използва методът за DNA-DNA и DNA-RNA. метод Хибридизацията може да създаде прилики и различия в първичната структура на нуклеинови киселини в различни проби.

Най-популярни:

Лечение на женски заболявания nbspnbspnbspnbspnbspnbspnbspnbsp Лечение на стави nbspnbspnbspnbspnbspnbspnbspnbsp стоматологично лечение