Оценка на клетъчна цитотоксичност класически феномен на цитотоксичност

Класически явление цитотоксичност - способността на Т-клетъчен лимфом fotsitov признае носещ елемент чуждестранен генетични характеристики (например клетки модифицирани вируси, туморни клетки, алогенни клетки и ксеногенни), и да ги унищожи. NK-клетки, за разлика от Т лимфоцити, разпознават като чужди клетки на тялото, които са загубили антигените на главния хистосъвместим комплекс (МНС молекула). Други клетки (например, В-лимфоцити, моноцити-макрофаги клетки, еозинофили, неутрофили, и т.н.), също са способни да цитотоксичност, но тази функция е свързана с участието на антитела срещу прицелните клетки - CM (антитяло-зависима клетъчна цитотоксичност), цитокини (TNF ) и други агенти. При физиологични условия, т.е. обикновено, цитотоксичността на имунни клетки отнася до премахването и унищожаването на стареещи и увредените клетки, като по този начин осигуряване на клирънс от многоклетъчен организъм остарели клетки и техните продукти от разпада.

Първичните клетки, цитотоксичният - antigenspetsi- графични инструменти цитотоксични лимфоцити (CTL) от NK (естествени клетки убийци), както и на броя на клетките от миелоидната (макрофаги, неутрофили).

цитотоксичната активност на клетки-убийци на се осъществява чрез директни синаптичните контакт лимфоцити (ефекторна kletki - CE) СМ. В CM индуцирана апоптоза.

В зрелите диференцирани цитотоксични лимфоцитни образуват гранули, съдържащи перфорин и гранзими. След образуването на синапси между CM и CE концентрат пелети в контактния регион и след това се освобождават в посока, CM. Перфорин в контакт с полимеризиран мембранната CM и включени в мембраната, като образува там диаметър на порите от около 100 А. В този момент проникне гранзими - ензими, които инициират апоптоза CM.

Индуциране на апоптоза в СМ може да възникне чрез молекулата на CD95 (също известен като Fas), съдържащ смъртоносния домен. CD95 лиганд осигурява FasL молекула (CD178), експресиран на CTL, NK-клетките. В някои случаи на ТВЕ трябва сами да се превърне в "жертва» Fas-медиираната апоптоза. Изразяване на FAS-молекули, те могат да се свързва с клетки, носещи Fas-лиганд, като potytke преодоляване на кръвно-мозъчната бариера. Свръхекспресия на Fas (CD95) молекули на активирани лимфоцити, показващи тяхната способност да се подложи на апоптоза при nesosto- yavshihsya физиологични процеси на пролиферация и диференциране Rovkov след активиране. Смята се, че този процес може да доведе до явление обозначен с имунна недостатъчност, причинена от активиране (LV Koval'chuk Cheredeyev AN).

В ин витро система, степента на разрушаване на МС по-близо до лизис. Методи за оценка на функционалната активност на CTL, има няколко, но "златен стандарт" е все още се считат за "тест хром". Под "хром" се разбира сол на натриев хромат, съдържаща радиоактивен изотоп хром - Na251Cr04, който се използва за маркиране на МС. Такъв етикет качват емпирично като относително отговаря на следните критерии: свободно проникват в живите клетки и не трябва да излизат навън, докато клетката е жива. Етикетът не влиза в стабилни съединения с вътреклетъчни структури и е в състояние да отидат в извънклетъчната среда на умиращ КМ.

Изборът KM - друга творческа задача, която експериментално решен в съответствие с целите на конкретен разследване. Най-честата употреба на KM тумор или вирусно инфектирани клетки. Когато МС избран допълнително експеримент диаграма накратко е както следва.