Класификация на хранителни среди - studopediya
Природен среда са естествени субстрати (мляко, кръв, серум, жлъчка, картофи). Изкуствен съдържа смес от природни органични вещества и продукти на киселина или ензимно разлагане. Синтетични среда се състоят от основа буферна сол и аминокиселинни разтвори. въглехидрати. пурини. пиримидин. нуклеотиди. нуклеозиди. мастни киселини. витамини точно както е предписано дози. Като източници на азот, аминокиселини се използват в тях. Предимството на тези среди е, че те имат постоянен състав, те могат да бъдат използвани за определяне на микробната изисквания на някои хранителни вещества.
Твърди хранителна среда се получава чрез прибавяне на течната връзка. Както печата обикновено се използва агар. Агар - продукт, получен от морски водорасли, е жълтеникав прах или плоча съдържа високи полизахариди молекулно тегло. не се раздели по-голямата част от микроорганизми не се унищожават чрез автоклавиране, хранителната стойност на медиите не се променя, тя не потиска растежа на микроби. За бактериологични и имунологични полета, използвани охладени, избистря агар, който по време на кипене или автоклавиране на сместа с вода прах се топи при температура от 85-100 ° С и охлаждане до 45-48 ° С се образува гел.
За подготовка, се прибавя твърд културална среда агар в концентрация от 1.5 до 3%.
Обикновено среда.
Месо-пептон (ВСН) е база протеин на всички носители.
Има няколко начина да се подготвят BCH:
а) във вода с месо пептон Ready - т.нар месо пептон;
агар на месо-пептон (МРА) - получава пътеки увеличаване на ВСН Arap-arapa (1,5-3%). Ако MPA е разпределена на диагоналните тръбите или флаконите - то наклон. За да се получи тръби за втвърдяване среда се оставя в наклонено положение. Ако средата е разпределена в тръбата на вертикалната височина 5-7 см, това е най-агар колона. IPA, замразени в петриеви панички под формата на чиния - агар. Ако средата е с вертикална височина слой от 2-3 см и диагонал слой от същия порядък е poluskoshenny агар.
Специално културна среда - околна среда, която създава условия за отглеждането на бактериите, които не растат по прост медии.
Кръв или агар бульон кръв - се получава чрез добавяне към културалната среда се загрява 5-10% стерилна дефибринирана кръв овце, зайци кон, човек. Средата се използва за изолиране на стрептококи, пневмококи и други бактерии, както и за изследване на хемолитична активност.
Суроватка или суроватка бульон агар се получава чрез добавяне на прости среди 15-20% конски или говежди серум. Сряда използва за изолиране на пневмококи, менингококи.
Gall бульон или жлъчна агар се получава чрез добавяне към културалната среда медицински жлъчката без консервант или прясно приготвен от едър рогат добитък. Сряда използва, за да се подчертае коремен тиф, паратиф и дизентерия пръчки.
Специално среда за култивиране на анаеробни бактерии: коте Tarotstsi среда се състои от хранителен бульон, глюкоза и чернодробни парчета или мляно месо за адсорбиране кислород.
Желатин - животински протеин, продукт на частична хидролиза на колаген. Той е под формата на безцветни или бледожълти плочи, без мирис и вкус. В студена вода набъбва силно абсорбиращ вода. При температура 30 ° С се разтваря, при охлаждане при 20-22 ° С се превръща в гел (желе). Използва се в микробиология за проучване на протеолитични ензими.
Диференциални диагностични условия позволяват да се разграничават един от друг видове микроби. Основната конструкция на диференциално диагностични носители на базата на различни биохимичната активност на бактерии. Структурата на диференциално-диагностичен медиите включва основна среда, осигуряване на възпроизвеждане на бактерии, някои химически субстрата, различно отношение на който е диагностичен показател, промяната на цвета е показателно за разширяване на субстрата и образуването на кисели продукти.
Ендо агар - гъста среда се използва за изолиране и първична идентификация на Enterobacteriaceae. В състава му включва, освен хранителна основа, лактоза, основния фуксин, избелени сулфит и натриев фосфат. Правилно варени Medium безцветен или има леко розов оттенък. Колониите от бактерии (Е. Coli) ферментиране лактоза, боядисани върху него в червено; бактерии не ферментират лактоза (салмонела) остане безцветна.
средно Левин (агар laktozoeozinmetilenovy) - среда за изолиране на ентеробактерии. Колониите от бактерии laktozofermentiruyuschih боядисани в тъмно синьо или черен цвят, laktozootritsatelnyh колонии от бактерии се развиват в цвета на средата (светло лилаво).
Хис среда - съвкупност от специфични въглехидрати за изучаване на ензимната активност на бактериите и тяхното разграничаване на тези основания.
Избираеми хранителни среди съдържат допълнителни вещества, които инхибират растежа на грам-положителни бактерии. Селективна хранителна среда за стимулиране на растежа на някои бактерии и инхибира растежа на другите. Селективни условия се получават чрез добавяне към средата химикали. Тъй като тези среди патогенни бактерии се размножават и се натрупват, наричан също обогатяване на околната среда.
Сряда Ploskireva - гъста хранителна среда, съдържаща жлъчни соли, Зеленка, лактоза и индикатор. Тази среда е не само селективен, тъй като инхибира растежа на много микроби и допринася за по-добър растеж на причинители на коремен тиф, паратиф, дизентерия, но също диференциалната диагноза, като laktozootritsatelnye бактерии (Shigella) форма на безцветни й колонии и лактоза - керемидено червен ,
Selenitovaya среда - е най-добрата среда за обогатяване на салмонела и дизентерия микроби Sonne. натриев селенит, съдържаща се в среда стимулира растежа на тези бактерии инхибират растежа на съпътстващите флора.
Сряда Мюлер служи за натрупване на салмонела. Към средата се добавя креда, разтвор на Lugol и натриев Hyposulfite. При взаимодействие на тези съединения с натриев тетратионат се образува, която инхибира растежа на Ешерихия коли, но създава благоприятни условия за растежа на Salmonella.
Бисмут сулфит агар (Blair-Wilson среда) - съдържа бисмут сол, брилянтно зелено. Salmonella расте в тази среда под формата на колонии от черен цвят. не се допускат Други видове бактериален растеж в тази среда.
Вителиновата сол агар (VSA) - среда за изолиране на Staphylococcus, съдържа 10% натриев хлорид, който инхибира повечето бактерии, съдържащи се в материала. Също така, тази среда е диференциалната диагноза, тъй като присъствието на яйчен жълтък lecithinase разкрива ензим (letsitovitellazu), които образуват патогенни стафилококи. Lecithinase разцепва в fosforholiny лецитин и водонеразтворими мастни киселини, обаче letsitinazopolozhitelnyh среда около колониите станат облачност и опалесцентен зона се появява като "хало дъга".
Telluritovye среда (суроватъчен telluritovy агар-агар кръв telluritovy) - селективна среда за изолиране на дифтерия бактерии, съдържащи калиев телурит. Безцветен телур сол, съдържаща се в средата, се възстановява бактерии дифтерия метал оцветяване колонии черно.
Алкална агар elektivam за Vibrio холерният, алкална реакционна среда (рН 9.0) не инхибира растежа на Vibrio холерният, но инхибира растежа на други микроорганизми.
Ецване среда - среда съдържа добавки, които предотвратяват размножаването на микроби и смърт, което допринася за запазване на тяхната жизнеспособност. Опазване на околната среда се използват, когато няма възможност за бързото заразяване на хранителни вещества медии.
За бактерии, най-често използваните консерванти:
а) глицерол смес, състояща се от 0,5 л химически чиста глицерол и 1.0 литра физиологичен разтвор;
б) борат смес;
в) фосфатен буфер смес.
За по-продължително съхранение на прясно изолирани и производствени култури се използват гладен полутвърд агар в средата с намалена способност да живеят микробните метаболитни продукти се натрупват леко, която насърчава добри култури за съхранение.
Специално среда.
В бактериология широко използван сух хранителна среда в промишленото производство, които са хигроскопични прахове, съдържащи всички съставки на средата от вода. За приготвянето им се използва триптичните Фурнаджиев евтини нехранителни продукти (рибни отпадъци, месо и костно брашно, технически казеин).
Те са лесни за транспортиране, може да се съхранява дълго време, за облекчаване на лабораторията от огромен процес на подготовка на медии, по-близо до решаването на въпроса с медийни стандарти. Медицинска индустрия произвежда суха среда Ендо, Левин Ploskireva, vismutsulfit агар, хранителен агар, индикатор въглехидрати BP и др.
За култивиране на микроорганизми, използващи термостати.
Термостат - този апарат се поддържа при постоянна температура. Апаратът се състои от нагревател камера, двойни стени, между които циркулира въздух или вода. Температурата се контролира термостат. Оптималната температура за размножаване на микроорганизми най-37 ° С
Методи за получаване на агар плака
IPA се стапя на водна баня, след това се охлажда до 50-55 ° С шията флакон уволнен пламък дух лампа, открита на Петри, така че на гърлото на бутилките е влязъл, без да докосвате краищата на чашките, изсипва се в 10-15 мл IPA затваряне капак шейк чаша, че средата е равномерно разпределена, са оставени на хоризонтална повърхност, преди втвърдяване. След сушене чаша с агар плака се съхранява на студено.
Ostuzhennoy стерилна линия взема капка материал лявата разкрие един ръб на чашата, като примка и вътрешността на противоположните краища на линия направят някои движения на едно място и след това откъсне от бримкови материал паралелни семена ударите от единия край на чашата до другия с интервал от 5-6 мм. В началото на засяване, когато микроби във веригата ще бъдат много, те ще излязат на растежа, но с всеки удар на микроби във веригата, има по-малко, и те ще останат единствен и да даде изолирани колонии.
Засяване на метод Drygalski
Този метод се използва, когато посяване материал изобилно микрофлора колонизация (гной, изпражнения, храчки). За сеитба по метода на Drygalski шпатула и да отнеме няколко чаши (3-4). Лопатка - инструмент направен от метална тел или чаша стъклени тръби, сгъната в триъгълник или L-форма. Loop материал или пипетира в първия чашата и шпатула равномерно разпределени по повърхността на средата, със същата шпатула, без изгаряне чрез това, материалът се втрива в културалната среда през втората чаша, а след това - в трета. С такъв култури в първата чаша ще излязат растежа и следващите чаши растат изолирани колонии.
Изолиране на чиста култура от Schukevichu
За засяване вземат прясно приготвена хранителна среда с кондензата. Материалът на тест се разтваря контур и привеждането внимателно асептично без да докосва среда и стените на кондензиране водата. Бактерии с висока мобилност "обхождане" на мократа повърхност на наклона.
В резултат на самостоятелна работа на ученика трябва да знаете:
1. Класификацията на морфологията на гъбички и техните методи на изследване.
2. Класификация и морфология на актиномицети.
3. Правилата за анти-режим и безопасност.
1. диференцират микроорганизми микроскопия.
2. Mikroskopirovat оцветени препарати.
3. обеззаразени материал дръжка рамо dezinfiruyuschimi препарати.
4. Препаратите се приготвят от чисти култури.